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Role of anions fluxes in insulin producing cells: characterisation and regulation of volume sensitive anion channels (VSAC) [Role of anions fluxes in insulin producing cells: characterisation and regularisation of volume sensitive anion channels (VSAC)]

Identifier les transporteurs et/ou les canaux anioniques impliqués dans l'efflux des ions en se concentrant sur deux candidats possibles : les canaux anioniques sensibles au volume cellulaire (VSAC) et le cotransporteur Na-HCO3 (NBC). Les buts spécifiques seront d'identifier, caractériser et étudier le rôle de NBC dans les cellules productrices d'insuline. Pour identifier le cotransporteur NBC dans la cellule beta, les techniques suivantes seront utilisées : immunohistochimie, Western-Blot, RT-PCR. Pour caractériser de cotransporteur NBC il faudrait établir la nature de mouvements de HCO3- (efflux ou influx) par l'efflux du bicarbonate et sodium en présence de l'inhibiteur ou l'activateur de cotransporteur NBC, mesure de pH intracellulaire et de membrane potentielle. Outre que NBC, il faudrait aussi voir l'absence ou presence d'autres échangeur d'anions (AE1, AE2, AE3, CFTR,..). Etudier la rôle de NBC dans le processus de sécrétion d'insuline avec l'effet des inhibiteurs de cotransporteur NBC, le dynamique de sécrétion d'insuline (pour l'effet immédiat ou pas, la réversibilité), la sécrétion d'insuline induite par d'autres nutriments (D-glucose, L-leucine, 2-ketoisocaproate,'), l'effet des inhibiteurs de cotransporteur sur le métabolisme des nutriments dans les ilots de Langerhans, l'effet des inhibiteurs sur la production et transport des ions bicarbonate and l'effet des inhibiteurs sur les mouvements du Na+, K+. Démontrer l'importance du cotransport Na-HCO3 en inhibant son expression ou au contraire en le surexprimant dans diverses lignées cellulaires productrices insulaire (BRIN BD 11, INS1 et MIN6). [Identification of the transporters and/or anion channels involved in the efflux of ions, focusing on two possible candidates: the volume sensitive anionic channels (VSAC) and Na-HCO3 cotransporter (NBC). The specific goals are to identify, characterize and study the role of NBC in the insulin-producing cells. To identify the cotransporter NBC in the beta cell, the following techniques will be used: immunohistochemistry, Western blot, RT-PCR. Characterisation of cotransporter NBC should establish the nature of movement of HCO3-(efflux or influx) by the efflux of bicarbonate and sodium in the presence of inhibitor or activator cotransporter NBC, measuring intracellular pH and membrane potential. Besides NBC, should also see the absence or presence of other anion exchanger (AE1, AE2, AE3, CFTR, ...). Studying the role of NBC in the process of insulin secretion with the effect of inhibitors cotransporter NBC, the dynamics of insulin secretion (for immediate effect or not, the reversibility), the insulin secretion induced by other nutrients (D-glucose, L-leucine, 2-Ketoisocaproate,...), the effect of cotransporter inhibitors on the metabolism of nutrients in islets of Langerhans, the effect of inhibitors on the production and transport of bicarbonate ions and the effect of inhibitors on the movements of Na +, K +. Demonstrate the importance of Na-HCO3 cotransport by inhibiting its expression or on the contrary, the over expression in various insulin producing cell lines (BRIN BD 11 INS1 and MIN6). ]



disciplines et mots clés déclarés


Biochimie Endocrinologie Physiologie générale

canal anionique sensible au volume cellulaire (vsac) canaux anioniques cotransporteur na-hco3 (nbc) îlots pancréatiques insulin secretion