Culture, maturation et fécondation in vitro de follicules aux stades préantraux et primordiaux. [In vitro culture, maturation and fertilization of preantral and primordial follicles]
La cryopreséservation des ovaires semble être la technique la plus prometteuse dans la prévention de la défaillance ovarienne suite aux traitements anticancéreux. Elle permet la conservation d'un grand nombre de follicules primordiaux, plus résistants à la cryopréservation que des ovocytes. Le projet propose de développer les techniques de cultures folliculaires in vitro permettant l'obtention d'embryons à partir de tissu ovarien préalablement cryopréservé. [Ovarian tissue cryopreservation is a crucial alternative for patients at risk of premature ovarian failure after antineoplastic treatment. This technique allows the storage of a large number of primordial follicles more resistant to the cryopreservation procedure than oocytes. The aim of the research is to develop different in vitro follicles culture systems in order to produce embryos from stored ovarian tissue.]

Prévention de la défaillance ovarienne précoce induite par les traitements anticancéreux [Prevention of premature ovarian failure induced by antitumoral treatment]
Les traitements anticancéreux induisent une défaillance ovarienne dans plus de 40% des cas. Le projet de recherche a pour but de prévenir cette complication en développant les techniques de cryopréservation du tissu ovarien permettant le stockage de gamètes sous forme de follicules primordiaux. L'autre aspect est l'évaluation de l'effet protecteur de différents agents pharmacologiques administrés concomitamment aux chimiothérapies. [Antineoplastic treatment induce a premature ovarian failure in 40 to 65% of the woman. The aim of the research is to prevent this adverse effect by optimising the technique of cryopreservation of ovarian tissue allowing the storage of a large number of primordial follicles. This project also evaluates the protective effect of different drungs during chemotherapy treatment.]

Evaluation de l'innocuité de l'autotransplantation de fragments ovariens chez les patientes ayant présenté une pathologie cancéreuse [Evaluation of the inocuity of autotransplantation of cryopreserved ovarian tissue for patients with cancer]
Dans notre centre, plus d'un tiers des indications de cryopréservation ovarienne concerne les patientes souffrant d'un cancer du sein. Peu de données sont actuellement disponibles quant au risque d'implication ovarienne dans le cas de cette pathologie. Nous développons des techniques de biologie moléculaire de détection des micrométastases mammaires au sein du tissu ovarien cryopréservé ainsi que des cellules cancéreuses circulantes dans le sang périphérique de ces patientes. ces techniques pourront ensuite être adaptée à la détection des cellules cancéreuses disséminées dans d'autres pathologies. [ In our center, more than a third of ovarian cryopreservation demands concerns young patients suffering from breast cancer. Few data are currently available about the risk of ovarian involvement in the case of this pathology. We develop molecular biology techniques to detect micrometastases originating from breast in the cryopreserved ovarian tissue and in in peripheral blood of these patients. these techniques can then be adapted to detect cancer cells spread from other pathologies. ]

Evaluation des techniques de cryopréservation du tissu ovarien dans un modèle de xénogreffe [Evaluation of different cryopreservation protocols of ovarian tissue by a xenograft model]
Actuellement, le tissu ovarien est cryopréservé par une technique de congélation lente (''slow freezing''). Récemment, la vitrification est apparue comme une technique prometteuse de cryopréservation des embryons et des ovocytes. Dans ce cas, la cryopréservation se déroule en présence de concentrations élevées en cryoprotectants, ce qui prévient la formation de cristaux de glace intracellulaire. Nous comparons l'efficacité de la cryopréservation du tissu ovarien par slow freezing et par vitrification dans un modèle de xénogreffe en souris SCID. Nous évaluons la fonctionnalité du greffon suite à sa greffe sous la capsule rénale et dans le muscle du dos des souris SCID à différents temps. Nous pratiquons également la culture in vitro du tissu cryopréservé. Notre but à terme est d'améliorer la survie des fragments ovariens suite à leur autotransplantation chez les patientes ayant bénéficié de notre protocole de préservation de la fertilité. [Currently, the ovarian tissue is cryopreserved by slow freezing technique. Recently, vitrification has emerged as a promising technique for cryopreservation of embryos and oocytes. In this case, cryopreservation is carried out in presence of high concentrations of cryoprotectants, which prevents the formation of intracellular ice crystals. We compare the effectiveness of cryopreservation of ovarian tissue by slow freezing and vitrification in a xenograft model in SCID mice. We assess the functionality of the graft after transplantion under the kidney capsule and the back muscle of SCID mice at different times. We also practice in vitro culture of cryopreserved tissue. Our aim is to improve the survival of ovarian tissue after its autotransplantation in patients who have benefited from our protocol of fertility preservation. ]

Constitution d'une banque de tissu ovarien cryopréservé: [Constitution of a bank of cryopreserved ovarian tissue:]
Dans le cadre de la préservation de la fertilité des patientes traitées à l'aide d'agents gonadotoxiques, notre laboratoire a développé et évalué les techniques de cryopréservation et de décongélation du tissu ovarien humain, permettant ainsi la mise en place d'une banque de tissu ovarien à l'hôpital Erasme depuis 1999. A ce jour, plus de 220 patientes ont bénéficié de ce protocole de préservation de la fertilité à l'hôpital Erasme. Récemment, nous avons en outre développé une technique complémentaire à la cryopréservation ovarienne qui consiste en le prélèvement d'ovocytes immatures au sein du tissu ovarien par ponction des follicules antraux visibles. Les ovocytes ainsi récoltés sont maturés in vitro et cryopréservés par vitrification.Cette méthodologie fournit une option supplémentaire de préservation de la fertilité, notament chez les patientes présentant une pathologie à risque de métastases ovariennes [n the context of fertility preservation in patients treated with gonadotoxic agents, our laboratory has developed and evaluated techniques of cryopreservation and thawing of human ovarian tissue, allowing the establishment of a bank ovarian tissue at the Erasme Hospital since 1999. To date, over 220 patients have benefited from this protocol of fertility preservation at the Erasmus Hospital. Recently, we have also developed a complementary technique to ovarian cryopreservation, which involves the collection of immature oocytes within the ovarian tissue by puncture of visible antral follicles. The oocytes harvested and matured in vitro are cryopreserved by vitrification.Cette methodology provides an additional option for fertility preservation, in particular in patients with disease at risk of ovarian metastasis. ]